高壓滅菌鍋使物品滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗中的一個基本保證。高壓滅菌鍋滅菌效果是否合格是實驗成敗的最基礎(chǔ)最關(guān)鍵的首要步驟。本文提供了進行滅菌效果驗證的一個簡易的方法。

1 試驗材料

嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU片]121 oC壓力蒸汽滅菌化學指示卡；溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基，116~C20分鐘高壓滅菌后備用。0—150 oC留點溫度計

2 方法與結(jié)果

將嗜熱芽孢桿菌紙片用無菌鑷子放人密封試管中�；瘜W指示卡和留點溫度計放人敞口的試管中。上兩種試管各準備5—10份。分別放置在高壓滅菌鍋蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層，則需放10處】。留點溫度計標化合格后可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應(yīng)在1oC之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應(yīng)在嚴格無菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。56—60~C培養(yǎng)2448小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未完全滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽孢菌已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照�；瘜W指示卡上的指示色塊，在高壓蒸汽滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏�。隨著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求�；瘜W指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。高壓蒸汽滅菌必須使蒸汽順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2／3)。二種驗證各重復(fù)三次，共做六次見表。5個點六次試驗表明溫度均在121 oC，化學指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明高壓蒸汽滅菌效果合格。