儀器名稱：紫外/可見分光光度計系統(tǒng)

　　儀器型號：Lambda 25

　　生產(chǎn)廠家：perkinElmer

　　使用方法：

　　開機步驟

　　1 開光譜儀電源

　　2 開計算機電源

　　3 在文件管理器中用鼠標指按UV WinLab圖標，此時出現(xiàn)UV WinLab的應用窗口，儀器已準備好，可選用適當方法進行分析操作。

　　2方法：

　　在分析中必須對分光光度計設定一些必要的參數(shù)，這些參數(shù)的組合就形成一個“方法”。Lambda系列UV WinLab軟件預設四類常用方法。

　　1)掃描(SCAN),用以進行光譜掃描。

　　2)時間驅(qū)動(TIME DRIVER),用以觀察一定時間內(nèi)某種特定波長處縱坐標值的變化，如酶動力學。

　　3)波長編程(WP)用以在多個波長下測定樣品在一定時間內(nèi)的縱坐標值變化，并可以計算這些縱坐標值的差或比值。

　　4)濃度(CONC)用以建立標準曲線并測定濃度。

　　2.1 進入所需方法，在方法窗口中選擇所需方法的文件名。

　　2.2 方法的設定

　　2.2.1 掃描、波長編程及時間驅(qū)動

　　各項方法可根據(jù)顯示的參數(shù)表，逐項按需要選用或填入，并可參考提示。

　　2.2.2 濃度

　　濃度方法窗口下方標簽較多，說明做濃度測定時需要參數(shù)較多。用鼠標指按每一標簽，可翻出下頁，其上有一些需要測定的參數(shù)。必須逐頁設定。

　　3 工具條

　　3.1 SETUP

　　當所需的各項參數(shù)都已在參數(shù)中設好后，必須用鼠標指按SETUP，才能將儀器調(diào)整到所設狀態(tài)。

　　3.2 AUTOZERO

　　用鼠標指按此鍵，分光光度計即進行調(diào)零(在光譜掃描中則進行基線校正)。

　　3.3 START

　　用鼠標指按此鍵，光度計即開始運行所設定的方法。

　　4 方法運行

　　4.1 掃描，時間驅(qū)動，波長編程

　　方法選好后，先放入?yún)⒈热芤�，按AUTOZERO鍵，進行自自動校零或背景校正結束后再放入樣品，按START，分光光度計即開始進行，同時屏幕上出現(xiàn)圖形窗口，將結果顯示出來。

　　4.2 濃度

　　4.2.1制訂標準曲線

　　1 方法選好后，確認各項數(shù)據(jù)正確，特別是REFS頁中第一行要選中右上角的“edit mode”。再放入?yún)⒈热芤�，按AUTOZERO鍵自動校零或背景校正。

　　2 按setup,待該圖標消失后，再按“start”,按提示依次放入標準色列的各管溶液，每次都按提示進行操作。

　　3 標準色列測定 完畢后，屏幕上出現(xiàn)calibgraphwindow,顯示擬合的標準線，并標出各項標準管的位置，屏幕下方還有一條Concentration mode的對話框，可以用來修改擬合的曲線類型(按 change calbration),或修改標準溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加標準溶液管數(shù)(add)。如過已經(jīng)滿意，則按analyse sample鍵，進入樣品測定窗口。

　　4 標準曲線有關的各項數(shù)據(jù)，均在calibresultwindow中，可用鼠標將其調(diào)出觀察。其中包括每個標準溶液的具體數(shù)據(jù)，標準曲線的回程方程式，相關系數(shù)，殘差。

　　4.2.2樣品濃度測定

　　4.2.2.1剛制定好的標準曲線接著進行樣品濃度測定時

　　1 只需在concentration mode對話框按analyse sample鍵，進入樣品測定窗口。

　　2 按設定的樣品順序放入各樣品管，每次按提示進行操作。

　　3 屏幕上出現(xiàn)結果窗口，結果數(shù)據(jù)將依次顯示在樣品表中的相應位置。

　　4.2.2.2利用原有的標準曲線接著進行樣品濃度測定時

　　4.2.2.2.1 調(diào)出所測定樣品的濃度方法文件，首先調(diào)出refs頁，將原設edit mode選項取消，改設左上角的using exiting calibration。重新將方法存盤，則今后再調(diào)用時即不需再作修改。

　　4.2.2.2.2 在sample頁中按要求重設各種樣品名稱機樣品信息。

　　4.2.2.2.3 按工具條中setup鍵，將主機設到該方法所設定的條件。

　　4.2.2.2.4 將參比溶液放入比色室，按autozero鍵做背景校零。

　　4.2.2.2.5 按start鍵，按設定的樣品順序放入各樣品管，每次按提示進行操作。

　　4.2.2.2.6 屏幕上出現(xiàn)結果窗口，結果數(shù)據(jù)將依次顯示在樣品表中相應位置。

　　5關機

　　5.1 將方法及數(shù)據(jù)存盤

　　5.2 關閉方法窗

　　5.3 退出UV WinLab

　　5.4 取出樣品及參比溶液

　　5.5 清潔光譜儀，特別是樣品室

　　5.6 關閉光譜電源

　　5.7 關閉計算機電源。