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光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)知識(shí)

[2011/3/1]

  顯微鏡術(shù)語 普通光學(xué)顯微鏡的基本工作原理是利用物鏡和目鏡的多組凸透鏡將物像逐級(jí)放大并反射到視網(wǎng)膜上的過程。而顯微鏡的性能和質(zhì)量的高低可通過分辨率、數(shù)值孔徑、總放大倍率等指標(biāo)來反映。

  (1)分辨率:衡量光學(xué)系統(tǒng)分辨相隔微小距離的兩個(gè)點(diǎn)能力的指標(biāo),即“能夠分辨兩點(diǎn)之間最小距離的能力”,稱之為光學(xué)系統(tǒng)的分辨率。一個(gè)光學(xué)系統(tǒng)它所能分辨的兩點(diǎn)之間的距離愈小,分辨率也就越高。

  (2)數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑(N.A.)是決定物鏡和聚光鏡性能的一個(gè)重要參數(shù)。用下式表示:

  這里n是在物鏡、透鏡和聚光鏡與標(biāo)本之間的一種介質(zhì)(空氣、浸油等)的折射率,而α則是孔徑角的一半。數(shù)值孔徑越大,圖像就越明亮,分辨率越高。

  (3)總放大倍率:顯微鏡的總放大倍率=單個(gè)物鏡的放大倍率×目鏡的放大倍率。

  (4)光學(xué)筒長:是指從觀察筒下端的結(jié)像透鏡到插入目鏡處的鏡筒頂端的長度。

  (5)工作距離:指當(dāng)一個(gè)標(biāo)本圖像被清晰聚焦時(shí),從物鏡的前端到蓋玻片的上表面的距離。通常,物鏡的放大倍率越高,其工作距離便越短。

  (6)物方視場:是指標(biāo)本在顯微鏡下實(shí)際能被觀察到圓形區(qū)域的直徑(mm)。

  (7)景深:指在對標(biāo)本某一斷面聚焦的狀態(tài)下,該面前后同時(shí)能被看清的景物范圍(深度)。物鏡的N.A.值(數(shù)值孔徑)越大,景深越淺。